Koronavirus sindroma akutne prašičje driske (SADS-CoV) je na novo odkrit prašičji enterični patogeni koronavirus, ki lahko povzroči vodeno drisko pri novorojenih pujskih in povzroči znatne gospodarske izgube v prašičerejski industriji.Trenutno ni primerne serološke metode za oceno učinkovitosti okužbe s SADS-CoV in cepiva, zato je nujna uporaba učinkovitega encimskega imunskega testa (ELISA), da bi nadomestili to pomanjkljivost.Tukaj je bil konstruiran rekombinantni plazmid, ki izraža spike (S) protein SADS-CoV, spojen s Fc domeno človeškega IgG, da proizvede rekombinantni bakulovirus in se izraža v celicah HEK 293F.Protein S-Fc je prečiščen s smolo proteina G in ohranja reaktivnost s protitelesi proti humanemu Fc in anti-SADS-CoV.Nato je bil protein S-Fc uporabljen za razvoj indirektne ELISA (S-iELISA) in optimizacijo reakcijskih pogojev S-iELISA.Posledično je bila z analizo vrednosti OD450nm 40 negativnih serumov SADS-CoV, potrjenih z imunofluorescenčnim testom (IFA) in Western blotom, mejna vrednost določena na 0,3711.Koeficient variacije (CV) 6 pozitivnih serumov na SADS-CoV znotraj in med serijami S-iELISA je bil manjši od 10 %.Test navzkrižne reaktivnosti je pokazal, da S-iELISA nima navzkrižne reaktivnosti z drugimi serumi prašičjega virusa.Poleg tega je bila na podlagi odkritja 111 kliničnih vzorcev seruma skupna stopnja sovpadanja IFA in S-iELISA 97,3 %.Test nevtralizacije virusa s 7 različnimi vrednostmi OD450nm seruma je pokazal, da je bila vrednost OD450nm, ki jo je zaznal S-iELISA, v pozitivni korelaciji s testom nevtralizacije virusa.Na koncu je bil izveden S-iELISA na 300 vzorcih seruma prašičjih farm.Komercialni kompleti drugih prašičjih enterovirusov so pokazali, da so bile stopnje pozitivnih IgG na SADS-CoV, TGEV, PDCoV in PEDV 81,7 %, 54 % oziroma 65,3 %., 6 % oz.Rezultati kažejo, da je S-iELISA specifična, občutljiva in ponovljiva ter se lahko uporablja za odkrivanje okužbe s SADS-CoV v industriji prašičev.Ta članek je zaščiten z avtorskimi pravicami.vse pravice pridržane.
Čas objave: 22. junij 2021